支原体是一种介于细菌与病毒之间,能在人工培养上生长繁殖的最小原核微生物,与男性泌尿生殖系统的多种疾病有关,为了探讨
男性不育的病因及治疗方案,检测了120名不育者精液中的解脲支原体(UU)和人型支原体(Mycoplasma hominis,MH),并对UU和MH进行药敏试验分析。报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
对照组:生育男性30例,年龄25~38岁。试验组:不育男性120例,已婚同居2年以上,未
避孕,年龄23~40岁。
1.2 样本采集
手淫法将精液射入无菌干燥广口瓶内,充分液化后,取精浆备用。
1.3 检测方法
支原体培养和药敏试验采用广东珠海益明生物工程制品厂生产的支原体培养。鉴定,药敏一体化试剂盒操作说明进行。将送检精液200 μl加入精体培养基中。充分振摇后,将混有精液的培养基分别加入培养孔和药敏孔中各100 μl,然后每孔加2滴无茵矿物油,以防水分蒸发,放入35~37℃恒温箱24~46 h。观察微孔中培养基颜色变化,分别记录支原体及10种药敏结果,判断敏感度。各孔培养基清亮,颜色由黄变红。表明有支原体生长记为阳性,不变色表明无支原体生长记为阴性。
1.4 统计学分析
计数资料比较采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
30例生育组精液中检出UU 2例,阳性率为6.2%;120例不育组精液中检出UU 31例、MR 6例、UU+MH 10例,阳性率为39.17%。2组结果经统计学处理,阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。药敏试验结果。见表1。表1 47例UU、MH药敏结果比较(略)
3 讨论
不育症的原因约35%~45%与男方有关[1],其中相当一部分患者是由于生殖系统的感染。随着男性学研究的不断开拓,评价男性生育能力的检测手段日益更新。检测精液中的UU和MH不失为有意义的检测手段之一。本文研究结果表明:支原体感染是不育症中不可忽视的重要因素。
支原体生殖道感染导致男性不育有以下几方面的机制:(1)支原体促进睾丸炎症细胞的侵润,损害精子生成且支原体可穿入生精细胞中,造成其结构破坏并从曲精小管中脱落,生精细胞结构破坏,从而使精子的数量减少;(2)支原体吸附于精子表面,摄取精子内的营养物质,利用膜内胆固醇,耗竭精子的主要成分,使其质量功能受损,精子死亡率增高。(3)支原体常吸附于精卵识别与融合区,造成精子运动阻力增大,运动能力减弱,并妨碍卵子对精子的识别、融合等受精过程[2]。(4)支原体感染后刺激了睾丸生精细胞,巨噬细胞产生白介素6(IL6)和
肿瘤坏子因子(TNFα)[3],以及支原体可导致白细胞精子症,活化的白细胞分泌可溶性产物TNFα等[4]而TNFα、IL6均可诱导精子凋亡的增加[5]。同时TNFα升高后使活性氧(ROS)增高。一方面ROS增高诱发DNA损伤会加速生殖细胞凋亡过程[6]。另一方面ROS可引发精子膜上的多聚不饱和脂肪酸发生脂类过氧化反应,生成的H2O2具有很强的细胞毒性使精子活率降低。
由于支原体缺乏细胞壁,所以对影响细胞壁合成的抗生素不敏感,对抑制或影响蛋白质合成的抗生素敏感。本组47株支原体对10种抗生素检测的敏感率显示:交沙霉素(95.74%),强力霉素(91.49%),阿齐霉素(93.61%),美满霉素(89.36%)对支原体有较高的敏感性,并且在治疗中不易产生耐药性,可作为治疗男性不育者感染支原体后的首选药物。红霉素,罗红霉素对支原体感染的敏感性次之,其抗菌机制主要是拮抗尿原体DNA旋转酶A和B亚单位,从而阻断支原体DNA复制达到杀灭支原体的目的,可作为次选药物。氧氟沙星中介度为最高,可能是由于这种抗生素在酸性条件下活性会下降,但其具有细胞内浓度分布高的特点。传统使用四环素治疗支原体感染的敏感率在逐年降低,其原因可能是支原体基因组中带有链球菌耐四环素基因,产生耐药性所致[7,8]。另外,位于支原体染色体上旋转酶基因发生突变,使DNA旋转酶靶位改变,从而降低药物积累产生耐药性。综上所述,本研究认为:采用支原体培养,鉴定,药敏一体化的试剂盒检测不育者精液中的支原体不仅可区别于遗传,免疫,生化等原因导致的不育,还可使部分原因不明的患者找到病因并得到及时有效的治疗。
参考来源:《河北医药》2008年7月30卷7期;《男性不育 精液 支原体检测 药敏分析》;刘艳波 左一鹏