温普红
(宝鸡文理学院化学化工系,陕西宝鸡 721007)
鬼臼毒素是皮肤科一线用药
疣迪搽剂的主要成分之一,它来自中药桃儿七,后者是小檗科植物桃儿七的干燥根及根茎,其性温、味苦,具有除
风湿、利气血、止咳等功效,常用于治疗风湿关节痛、趺打损伤、风寒咳嗽、铁棒锤中毒等症。从成分上看,木脂素的主要成分为鬼臼毒素, 其次为α-盾叶鬼臼素,盾叶鬼臼素,4''''-去甲鬼臼毒素,去氧鬼臼毒素,4''''-去甲去氧鬼臼毒素,异鬼臼苦酮,锡金鬼臼毒素和木脂素甙等。近年来的研究发现,鬼臼毒素除可用于治疗
尖锐湿疣、抑制
疱疹病毒外,它还是半合成抗癌药物依托泊苷(VP-16) 的主要原料。因此对制备高纯鬼臼毒素的工艺有重大的现实意义。
笔者利用鬼臼毒素能形成溶剂加合物的特性,采用二步结晶法,使粗品的纯化步骤大为减化,在不用柱层析分离法的条件下,成功地制备出了质量分数大于96%的鬼臼毒素精品,总产率为1.7%。现简述如下:
仪器和试剂
R-201型旋转蒸发器;SHB-B水循环多用真空泵;HH-4数显恒温水浴锅;LC-4A高效液相色谱仪;X4型显微熔点测定仪。
桃儿七根茎(产自陕西太白);鬼臼毒素对照品[w(鬼臼毒素)=98.5%,中国药品生物制品检定所提供];工业甲醇;苯、无水乙醇、活性炭均为分析纯。
鬼臼毒素的提取分离与纯化
提取分离:称取 100.Og干燥的、已粉碎的桃儿七根,用甲醇在7O℃回流提取3次,每次2h;合并提取液并浓缩成红棕色浸膏后,再用苯在 80
℃回流提取2次,每次2h。过滤,所得滤液被浓缩至一定体积,放置结晶,过滤后得到2.5g浅黄色的粗品。
纯化:将粗品用无水乙醇溶解,加入活性炭,煮沸20min脱色。过滤后,将滤液浓缩成树脂状,加苯悬浮溶解,弃去不易溶解的黄棕色杂质,滤液浓缩结晶,重复上述纯化操作 2次。所得晶体在苯中反复重结晶直到在器皿壁上观察不到黄色析出物,用苯-乙醇[V(苯):V(乙醇)=2:1]为溶剂,将晶体在80℃加热溶解,冷却后,析出白色针晶。将其在125℃的烘箱中烘2h,脱去溶剂分子后,即得鬼臼毒素精品。
样品的测定
应用紫外分光光度法、薄层扫描法、荧光光度法和高效液相色谱法测定植物中鬼臼毒素的方法已有报道。本项目组采用 HPLC法测定样品中的鬼臼毒素,此部分工作由陕西省中医药研究院承担。
结论
桃儿七的甲醇提取物,经苯在80℃回流提取,活性炭脱色,除去大部分杂质后,利用鬼臼毒紊形成溶剂加合物的特性,采用二步结晶法,经晶型转化,脱去溶剂分子后,即可制得质量分数不低于96%的鬼臼毒素精品。该法与柱层析法相比,虽然产品中鬼臼毒素的含量略低,但由于不需要特殊的设备且操作简便,适合于大批量生产,因此,在提高产量、降低生产成本方面具有较强的优势。
(收稿日期:2001-07-26)