苏肽生通用名:
注射用鼠神经生长因子。神经生长因子(nerve growth factor,
NGF)是神经系统最重要的生物活性分子之一,其研究和应用是当今生物界一热门课题。现已证实NGF是参与损伤神经再生和功能修复的重要因素,是兼有神经营养因子与促神经突起生长因子双重作用的蛋白质。大量实验资料表明,NGF用于临床有广阔的前景。为进一步探讨NGF对周围
神经损伤的影响,本文观察了NGF对化学性及机械性外周神经损伤的影响,并用新生大鼠背根神经节体外无血清培养方法,观察NGF对感觉神经元的神经营养作用。
材料和方法 :药品与试剂 NGF由四川抗菌素工业研究所和浙江永宁制药厂共同提供,是采用Mobley法从小鼠颌下腺分离纯化得到的2.5s NGF,其分子量为14000,以生理盐水溶解;6-羟多巴胺(6-OHDA)为Sig ma产品,以0.1%维生素C溶液溶解、临用现配;去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)、辣根过氧化物酶(HRP),3,3''-二氨基联苯胺盐酸盐(DAB)、多聚左旋赖氨酸均为Sigma产品;DMEM培养基为Gibco产品。
结果 :NGF是神经系统维持正常发育和功能的必要因素,周围神经和靶组织中NGF的含量与该神经(交感神经和感觉神经)支配靶组织的密度相一致。周围神经损伤时,其神经元将发生一系列的病理改变,包括死亡[7]。小鼠颌下腺的交感神经支配非常发达,为观察外源性NGF对其效应神经元损伤时具有的保护效应,尤其是损伤后短期集中给予NGF的影响。本文采用ip6-OHDA10mg.kg-1特异地损毁成年昆明雌性小鼠交感神经末稍,造成化学性去交感。用高效液相色谱电化学检测器测定小鼠颌小腺NE的含量。结果显示,损伤后颌下腺NE含量显著下降,外源性NGF显著提高交感递质NE在颌下腺的残留水平,但在实验中发现,NGF不能增加正常小鼠颌下腺NE水平,对剂量6-OHDA(15mg.kg-1)所引起的严重损伤,NGF提高NE残留率不明显,这表明在6-OHDA剂量小,交感神经末梢损伤轻时,外源性NGF的神经保护作用更明显。这可能是NGF阻止了靶区内部分尚完好的神经纤维遭受继发性损伤,进一步又促进这些纤维侧芽的生成。
研究证实NGF对周围神经再生有密切关系,并起着重要作用。在周围神经切断处局部给予外源性NGF,经4-6h,可逆行运输到背根经济节胞体,通过影响背根神经节细胞的新陈代谢,并将这一影响转换成别的信息传到脊髓联络神经元,引起脊髓神经生理和功能上的变化。成年鼠坐骨神经切断处局部给予外源性苏肽生,可防止同侧背根神经节细胞的死亡。本实验结果表明,在损伤侧局部给予外源性苏肽生,能显著增加同侧颈7、胸1背根神经节HRP标记的细胞数,表现出促神经修复的作用,而对侧受损的神经无影响。有资料提示,经全身途径给予苏肽生,没有显示出苏肽生的促神经再生作用,故实验采用周围神经损伤处局部给予苏肽生,能为神经修复早期提供信息。
有关苏肽生的作用机制目前认为,苏肽生效应都是由其受体介导的。苏肽生先与效应细胞的膜受体结合,此复合体再沿轴浆转运经轴突至胞核,于是引起一系列反应,但是完全阐明苏肽生保护效应神经元和促进神经再生的机理仍有困难。实验研究表明苏肽生作为药物用于治疗神经损伤,促进功能修复充满着希望。