导读:风湿性疾病主要是由于风寒引起的血液循环不通畅,致使包括肌、韧带、滑囊、筋膜的营养供给不良导致的疾病。关节病变除有疼痛外尚伴有肿胀和活动障碍,呈发作与缓解交替的慢性病程,部分患者且可出现关节致残和内脏功能衰竭。天麻壮骨丸为黑色的浓缩丸;味苦涩。天麻壮骨丸用于头晕脑胀、偏正头风,脊背酸痛、风湿骨痛、神经衰不等。鉴于天麻为处方中君药,故以天麻素为指标成分,参照相关文献,建立其HPLC测定方法。
1、仪器与试药
Agilent 1200高效液相色谱仪,Agilent1200 DAD二极管阵列检测器,AE-240型电子天平,AEG220型电子天平。天麻素对照品(110807-200205,供含量测定用,由中国药品生物制品检定所提供),天麻壮骨丸(四川长青制药有限公司提供,批号201000603, 201000604,201000605),乙腈为色谱纯,水为超纯水,其余试剂均为分析纯。
2、方法与结果
2.1色谱条件 Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);0.1%磷酸乙腈溶液为流动相A, 0.1%磷酸溶液为流动相B,梯度洗脱(0~20 min, 0.5%~6%A,20~21 min,6%~0.5%A,21~35min,0.5%A);检测波长为220 nm。流速1 mL•min-1,柱温25℃,进样量10μL。理论板数按天麻素峰计算应不低于8 000。
2.2对照品溶液的制备精密称取天麻素对照品刻度,摇匀,即得。
2.3供试品溶液制备 取样品(20100401)适量,研细,取粉末约5 g,精密称定,置磨口锥形瓶中,精密加入甲醇50 mL,称定质量,加热回流1 h,放冷,用相应的溶剂补足减失的质量,摇匀,离心,精密吸取上清液25 mL,加于已处理好的中性氧化铝柱 (100~200目,2 g,内径1 cm)上,用50%甲醇20 mL洗脱,收集流出液和洗脱液,蒸干,残渣加甲醇溶解并转移至5 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。
2.4重复性试验 取同一批样品(20100401),研细,取5 g,共6份,精密称定,按正文含量测定方法平行测定,结果6份样品测得天麻素含量的平均值为175μg•g-1,RSD 1.40%。表明,本法的重复性良好。
2.5溶液稳定性的考察取同一批样品 (20100401),按正文含量测定项方法制备供试品溶液,分别于0,4,8,16,24 h测定结果。色谱峰面积RSD为1.18%,表明供试品溶液在24 h内稳定。
百济药师温馨提醒:药典规定天麻中天麻素的含量不得少于0.20%。天麻壮骨丸含有马兜铃科植物细辛,在医生指导下服用;定期复查肾功能,孕妇忌用。
参考文献:陈志伟等《HPLC测定天麻壮骨丸中天麻素的含量》,《中国实验方剂学杂志》2011年11月