白癜风病因及发病机制至今不清,治疗非常困难。我们从2004年开始用自体表皮细胞体外培养移植联合窄谱中波紫外线照射治疗了32例静止期白癜风,取得了满意疗效,现将结果报道如下。
目的:探索自体黑素细胞移植联合窄谱中波紫外线(NBUVB)照射治疗白癜风的方案。
方法:用自体黑素细胞体外培养,并用发疱法移植联合NBUVB治疗静止期白癜风,与单纯黑素细胞移植治疗静止期白癜风疗效比较。
结果:自体黑色素细胞移植联合NBUVB治疗静止期白癜风32例,共移植105块,总有效率98.0%。单纯黑素细胞移植治疗静止期白癜风25例,共移植82块,总有效率91.5%。治疗组疗效高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论:自体黑色素细胞移植联合NBUVB照射治疗白癜风安全有效。
1 资料与方法
1.1 临床资料 57例静止期白癜风患者系2004年1月—2006年12月在我院住院或门诊病例。均符合白癜风诊断标准[1]。入选病例按随机单盲原则分为2组。治疗组32例,其中男22例,女10例;年龄15~46岁,中位年龄31.5岁;病程2~20年,中位数8.3年;局限型9例,节段型5例,散发型19例;有家族史5例;共移植105块,平均每块4 cm2。对照组25例,其中男19例,女6例;年龄14~38岁,中位年龄28.9岁;病程1.8~21年,中位数8.9年;局限型2例,节段型2例,散发型21例;有家族史1例;共移植82块,平均每块4 cm2。2组患者治疗前3个月无激素治疗史,排除器质性疾病及
瘢痕体质。
1.2 治疗方法 治疗组:共移植105块。正常头皮部位浅层取皮0.5 cm×0.5 cm大小,胰蛋白酶消化制成细胞悬液,然后接种到含RPMI 1640培养基培养瓶中,2~3 d换液1次,隔日窄谱中波紫外线照射1次,共照射120 min,总剂量为14.4 J/cm2。观察生长情况,进行黑素细胞计数与传代,一般传至4代80%融合时(此过程约需15 d左右),用含有小牛血清的生理盐水终止,并用生理盐水将细胞悬液调至(0.3~0.5)×105个/ml浓度。移植区常规消毒后用负压吸引发疱法处理(表皮移植
白癜风治疗仪BY11,山东神思医疗设备有限公司生产),工作负压1.8 kPa,40 min后水疱形成。抽取疱中的大部分渗液,再由原针孔处注入黑素细胞悬液,注射密度按照250~1 000个/mm2移植到发疱区内[2]。移植黑素细胞约12 h内即开始贴壁生长。患者于移植后3 h开始照射紫外线,隔日1次,初始剂量0.25 J/cm2,以后每次增加30%~40%。8周后观察疗效。对照组:共移植82块。细胞培养与移植方法同治疗组,进行移植后不做紫外线治疗。8周后观察疗效。
1.3 疗效判断标准 按1995年全国色素学病组制定的疗效标准对移植效果进行评定:痊愈:白斑全部消失,恢复正常皮肤。显效:白斑部分消失或缩小,恢复正常肤色面积占皮损面积≥50%。有效:白斑部分减退或缩小,恢复正常肤色面积占皮损面积≥10%而<50%。无效:白斑无变化或缩小,恢复正常肤色面积占皮损面积<10%。有效率(%)=(痊愈+显效)/总块数×100%。
1.4 统计学方法 计数资料以率表示,采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 近期疗效 治疗第8周后,治疗组有效率(98.0%)高于对照组(91.5%),差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。表1 治疗8周后2组效果比较注:与对照组比较,P<0.05
2.2 远期疗效 随访6个月,其中治疗组2例患者5块自体黑素细胞移植区出现色素变浅现象,无复发及新发病例。对照组1例患者3块自体黑素细胞移植区出现色素变浅现象,无复发及新发病例。所有患者均未发生感染。
3 讨 论
白癜风的药物治疗效果多不满意。1982年美国Eisinger等[3]首先在含有TPA(120十四酰佛波醇13乙酸酯)、霍乱毒素(CT)与5%胎牛血清的MEM培养液中培养黑素细胞获得成功,1987年Lerner等[4]首次应用培养的自体黑素细胞移植治疗白癜风获得成功。此后国内外相继开展此类研究、应用。而NBUVB现已广泛应用于白癜风的治疗,其生物学机理如下:(1)刺激黑素细胞的增殖和移行,当黑素细胞吸收UVB能量后,还可刺激酪氨酸酶的活性,加速酪氨酸的氧化和聚合,使黑素合成增加。(2)可以促进角质形成细胞释放促黑素细胞增殖分化的因子如内皮素1、成纤维细胞生长因子等。(3)UVB具有免疫抑制作用,可使移行及增殖的黑素细胞免受破坏。
本结果表明,采用自体黑色素细胞移植联合窄谱中波紫外线照射治疗白癜风有许多的优势:(1)自体黑色素细胞体外培养可以用较少的源表皮获得更多的黑素细胞;(2)损伤小,仅以环钻取头皮部位浅层皮肤0.5 cm×0.5 cm大小,无须缝合;(3)较异体黑素细胞移植减少了排异风险[5];(4)传统黑素细胞培养基中通常含有TPA、CT与异丁基甲基黄嘌呤以促进黑素细胞增殖,而TPA具有潜在性促
肿瘤的作用,而我们不仅仅改良了培养基,也未添加TPA,从而降低了诱发肿瘤的风险;(5)在黑素细胞培养时加照紫外线,培养出的黑素细胞较未照紫外线的黑素细胞明显活跃,表现为双极或三极细胞,多极细胞明显增多,黑素细胞树突明显延长,数量明显增加,细胞轮廓较明显,移植活性更强,有效率(98.0%),较其他自体黑素细胞移植报道(有效率80%左右)明显提高[6~8];(6)移植后即进行紫外线照射,不仅可促进创面愈合,还可促进黑素细胞生成,提高治愈率。二者联合治疗明显提高了白癜风治疗的有效率。
虽然以往治疗静止期白癜风的方法很多,但是均很难短时间内获得较好的临床疗效,甚至多数患者无效。而本方法适用于所有静止期白癜风患者,无论平整或凹凸部位均可进行治疗,观察结果表明,临床有效率也有显着提高。缺点是费用相对较高,细胞培养的实验室要求严格。另外,Puri等[9]报道白癜风患者非皮损处的黑素细胞也有缺陷,其繁殖能力相当于正常人的25%~50%,且局部皮损处自身功能紊乱,可能是我们随访6个月后部分患者移植后出现色素变浅的原因之一。
参考来源:《疑难病杂志》2008年7月7卷7期;《自体黑素细胞移植结合窄谱中波紫外线治疗 白癜风临床观察》;王根会,雷明君,赵云夕,冯兰珍,刘焕强