益视是由制何首乌、厚朴(姜制)、木香、党参、当归等十四味药材组成,具有滋肾养肝,健脾益气,调节视力功效 。而
益视颗粒的部颁标准中没有其相应药材的TLC鉴别和有效成分含量测定指标。为了能有效的控制益视颗粒的产品质量,本研究采用TLC法对方中的制何首乌、厚朴、木香等三味药材进行定性鉴别。
样品:益视(江西聚仁堂);益视颗粒阴性对照品(按处方药味除去被测药材,其余药味按成药的生产工艺制备成的样品)为自制。
薄层色谱鉴别:制何首乌 取益视颗粒10 g研碎,加氯仿30 mL,超声处理30 min,滤过,滤液蒸干,残渣加氯仿1 mL使溶解,作为供试品溶液。另取缺制药物分析杂志何首乌其他各药材,按工艺制备的阴性对照品10g,同法制成阴性样品溶液。取制何首乌对照药材1 g,加氯仿20 mL,超声处理10 min,滤过,滤液蒸干,残渣加氯仿1 mL使溶解,作为对照药材溶液。再取大黄素对照品适量,加氯仿制成每1mL含0.2 mg的溶液,作为对照品溶液。依据薄层色谱法(2005年版中国药典一部附录ⅥB)试验,吸取上述溶液各5 L,分别点于同一硅胶G板上,以甲苯(水饱和)一乙酸乙酯一甲酸(10:1:1)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,再置氨蒸气熏至斑点显色清晰。
厚朴取益视颗粒2 g加20 mL水微热溶解,加盐酸2 mL,用乙醚振摇提取3次,每次20 mL,合并乙醚提取液,用5%碳酸钠溶液洗涤3次,每次20mL,弃去碱液,乙醚液蒸干,残渣加甲醇1 mL使溶解,作为供试品溶液。另取缺厚朴药材阴性对照品2 g,同法制成阴性样品溶液。再取厚朴酚对照品适量,加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(2005年版中国药典一部附录ⅥB)试验,吸取上述溶液各10 L,对照品溶液5uJL,分别点于同一硅胶G板上,以苯一甲醇(27:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以磷钼酸乙醇试液,在100℃加热至斑点显色清晰。
研究结果:表明TLC法可定性鉴别出益视颗粒制剂中制何首乌、厚朴和木香,此法操作简单,分离满意,专一性强,重现性好。益视颗粒中君药制何首乌含蒽醌类和二苯乙烯苷类成分,其中蒽醌类成分主要为大黄素和大黄素甲醚,均为脂溶性成分,若以大黄素作为益视颗粒水提工艺的定量指标时,含量测定时样品需经酸水解和氯仿萃取处理,操作较复杂,且含量很低,不便于建立定量检测方法,不能准确反映本品的内在质量。而四羟基二苯乙烯苷为水溶性有效成分,含量高,含量测定方法简单,2005年版中国药典一部也收载了四羟基二苯乙烯苷的高效液相色谱法含量测定方法。本研究参考有关文献 ,选择四羟基二苯乙烯苷为检测对象,建立HPLC控制益视颗粒质量的方法。该方法快速、简便,精密度高,承现性好,为益视颗粒的质量标准的制订提供依据。
(本文节选自《益视颗粒的质量标准研究》)